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新芝-細胞粉碎蛋白提取

[導讀]新芝儀器-銀耳總蛋白的有效提取是進行銀耳蛋白質生理功能研究的重要前提,不同食用菌材料的最適提取方法不同,在對虎奶菇菌絲體自溶蛋白質制備方法的研究中,比較了超聲波和液氮研磨兩種細胞破碎方法,發現液氮研磨得到的粗蛋白和純蛋白產量均高于超聲波法。

期以來對于銀耳生理功能的研究主要集中在銀耳多糖及酚酸等方面,而蛋白質作為銀耳中第二大類營養成分,對其生理功能的研究較少。銀耳總蛋白的有效提取是進行銀耳蛋白質生理功能研究的重要前提,不同食用菌材料的最適提取方法不同,在對虎奶菇菌絲體自溶蛋白質制備方法的研究中,比較了超聲波和液氮研磨兩種細胞破碎方法,發現液氮研磨得到的粗蛋白和純蛋白產量均高于超聲波法;在草菇菌絲及子實體總蛋白的提取中采用了三氯乙酸(trichloroaceticacid,TCA)-丙酮沉淀法;在靈芝子實體原基總蛋白質的提取中,比較了三羥甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane,Tris)-飽和酚法和TCA-丙酮沉淀法的提取效果,而有關銀耳總蛋白的提取目前卻鮮有報道。

  銀耳芽孢是銀耳擔孢子產生的酵母狀分生孢子,俗稱“芽孢”(yeast-like conidia,YLC),比菌絲體及子實體更易獲得。本研究以銀耳芽孢為材料,在液氮研磨的基礎上分別采用超聲波與高壓均質進行細胞破碎,比較Tris-飽和酚法、TCA-丙酮沉淀法及Tris-飽和酚結合TCA-丙酮沉淀法3 種方法提取銀耳芽孢總蛋白的效果,旨在建立一種有效的銀耳芽孢總蛋白提取方法,為后續銀耳蛋白質生理功能的探索、蛋白質組學的研究及在食品加工中的應用奠定基礎。


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