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超聲波提取玉竹總皂苷的工藝研究

[導讀]其中皂苷類化合物具有較強的抗氧化能力,抗衰老,增強機體免疫力的生物活性。甾體皂苷類化合物被認為是玉竹的主要有效成分之一,按其苷元類型可分為螺甾烷醇類和呋甾烷醇類兩類結構類型。 目前,文獻顯示,玉竹總皂苷類型主要以呋甾烷醇類即薯蕷皂苷元類型皂苷為主。

玉竹(Polygonatumodoratum)為百合科黃精屬植物,以其干燥根莖入藥。玉竹的化學成分主要包括皂苷、多糖、生物堿、黃酮等,具有增強免疫力、降壓、抗衰老、抗腫瘤等功效。其中皂苷類化合物具有較強的抗氧化能力,抗衰老,增強機體免疫力的生物活性。甾體皂苷類化合物被認為是玉竹的主要有效成分之一,按其苷元類型可分為螺甾烷醇類和呋甾烷醇類兩類結構類型。 目前,文獻顯示,玉竹總皂苷類型主要以呋甾烷醇類即薯蕷皂苷元類型皂苷為主。因此,用紫外檢測常采用甲醇-硫酸法或高氯酸法在408nm波長處具有最大吸收值。本課題玉竹來源于北京同仁堂(亳州),發現其提取出的總皂苷在采用高氯酸顯色法時的紫外最大吸收波長(315nm)與菝葜皂苷元類型皂苷采用該法的最大吸收波長(310nm)基本吻合。因為薯蕷皂苷元與菝葜皂苷元結構上相差一個雙鍵,采用高氯酸法的紫外吸收波長位置不同,所以可推測出,不同產地的玉竹中所含總皂苷類型不同。因此,用薯蕷皂苷元作為玉竹總皂苷的對照品具有一定局限性。本課題所采用菝葜皂苷元作為對照品,增加了一種新的測量玉竹總皂苷的方法。 響應面法是一種統計學實驗設計方法,目前常被用于植物提取過程的優化,確定最佳水平范圍。本實驗在單因素實驗中分別考察了超聲波功率、超聲時間、料液比對得率的影響。在單因素實驗結果基礎上與玉竹總皂苷提取含量進行響應面實驗設計,優化總皂苷提取條件。通過Design-Expert軟件對實驗數據進行回歸分析,預測玉竹總皂苷提取的最優產率。為進一步開發利用玉竹資源以及新藥研發提供科學穩定的依據。

 1材料與方法 1.1材料與儀器 玉竹市售中藥飲片,經吉林化工學院王曉林教授鑒定為百合科黃精屬植物玉竹的地下根莖(北京同仁堂(亳州)飲片有限責任公司);菝葜皂苷元對照品為色譜純(供含量測定用,批號:PCM-AA-001)天津士蘭科技有限公司;乙醇、甲醇、高氯酸、石油醚均為分析純天津市永大化學試劑有限公司。 某型電腦微波超聲波紫外光組合催化合成儀;某型紫外-可見分光光度計;某型電子分析天平;某型高溫鼓風干燥箱;某型旋轉蒸發儀。 

1.2實驗方法 1.2.1藥材的預處理 取50干燥24h的玉竹飲片,粉碎,過20目篩。準確稱取50.0g,置于圓底燒瓶中,加入一定量石油醚(60~90)加熱回流脫脂。抽濾,除去濾液,烘干,得到預處理的玉竹。

 1.2.2供試品溶液的配制 精確稱取預處理的玉竹2.0g于50mL三口瓶中,加入一定量60%乙醇,在一定的超聲功率下,加熱至50超聲提取后,減壓過濾,濾液旋轉蒸發至干,將提取物溶于適量蒸餾水,加入5倍體積無水乙醇沉淀脫糖(過夜沉淀)。過濾,濾液旋轉蒸發至干,加入適量蒸餾水使其溶解,轉移到分液漏斗中,加入正丁醇萃取兩次(每次20mL),合并正丁醇相,將萃取液旋蒸濃縮至干,干膏用甲醇溶解,并用0.45m濾膜過濾,濾液轉移到10mL容量瓶中,加甲醇至刻度,得到供試品溶液。 

1.2.3對照品溶液的配制 精密稱取菝葜皂苷元對照品6.0mg,置于25mL容量瓶中,加入無水甲醇,超聲使之溶解,并用無水甲醇定容至刻度,配制成菝葜皂苷元對照品溶液(0.24mg/mL)。

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